剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。侯建成

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。鸡新城疫是由病毒引起的一种急性败血性传染病。俗称“鸡瘟”,即所谓亚洲鸡瘟。本病一年四季均可发生,尤以寒冷和气候多变季节多发。各种日龄的鸡均能感染,20日龄—60日龄鸡最易感,死亡率也高。主要特征是呼吸困难,神经机能紊乱,粘膜和浆膜出血和坏死。下面一起来具体了解一下:鸡新城疫的症状
鸡新城疫的实验室诊断。

笔者多年一直从事养禽及禽病诊疗工作,对剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。新城疫的危害及防控略有体会,现总结如下,仅供参考。

(黑龙江省宁安市动物疫病预防控制中心,黑龙江宁安157400)

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剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。1 鸡新城疫的临床特点和诊断

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。摘要:鸡新城疫也称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟,是由一种病毒引起的高度接触性传染病,常呈急性败血症经过。在病初或症状不典型时,可能与鸡霍乱、传染性支气管炎和传染性喉气管炎等病混淆,应注意鉴别诊断,本文从实验室诊断和病毒分离与鉴定对该病的诊断进行详细介绍。

1、临床症状

鸡新城疫又名亚洲鸡瘟,过去农村中俗称”鸡瘟”,是一种烈性高度接触性的传染病,发病率和死亡率都很高。据老年人记忆,在几十年前,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡,以致春节都没有鸡上餐桌。

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。鸡新城疫的诊断是根据流行病学的记载,如本病只感染鸡,发病率和死亡率都很高,常呈现毁灭性流行,结合临床上呈严重下痢,呼吸困难,死亡较慢者常出现神经症状,病理解剖见有消化道的弥漫性点状出血和溃疡,以及脂肪组织的针尖状出血点等方面的综合症状,一般可以作出初步诊断。但确实可靠的诊断常须借助实验室的检查。

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。患鸡体温升高到43~44℃,精神沉郁或闭眼嗜睡,病鸡腹泻呈黄白色或绿色,有时带血,常摇头、暖气,发出“咯咯”声,口和鼻中有多量黏液,嗉囊内积液,病程稍长或呈慢性经过时,常有腿、翅麻痹或头、颈歪斜等神经症状。剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,有时形成溃疡,尤其在腺胃与食道交界部更为明显。肌胃黏膜上有点状或不正形的出血斑点。肠道、尤其是盲肠扁桃体和小肠黏膜以及直肠黏膜上出血和不同大小界限清楚、出血性纤维素坏死伪膜,其他各部位如心、腹部脂肪及喉头、气管等处都有出血斑点。

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。该病病原是新城疫病毒,是一种禽副黏病毒,病毒有血凝性,通常检测新城疫血凝抑制抗体水平就是根椐病毒这一特点而设计的。

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。1 实验室诊断

2、病毒分离

该病已广泛存在于世界上很多国家和地区,过去我国也曾在鸡群中大流行,自从广泛接种疫苗之后,大暴发很少发生,多为零散发生。

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。诊断鸡新城疫和鸡霍乱,可采取病鸡的脾、脑等乳剂,肌肉或皮下注射健康鸡和兔或小兔各2~3只,如果鸡和兔或小鼠在短期内发病死亡,并在血液涂片中看到有两极染色的短杆菌时,即可判定为鸡霍乱。如果仅见接种鸡发病死亡,并在症状和病理解剖上也有鸡新城疫的特征时,则可判定为鸡新城疫。如果条件许可,在接种健康鸡的同时也注射2~3只新城疫免疫鸡。若免疫鸡不死而未免疫的健康鸡死亡时,就进一步确诊为新城疫。若免疫鸡和未免疫鸡都死亡,又未检出细菌,症状及剖检又近似鸡新城疫时,则可能是真性鸡瘟。

剖检特征病变是腺胃的乳头突起部或黏膜上有点状或斑状出血,往往因发生鸡瘟而使整个村庄的鸡只几乎100%死亡。材料应采自早期病例,慢性病例不适宜于分离禽病毒,病鸡扑杀后应用无菌手术采取脾、肾、肝、肺(通常有较高的病毒滴度),脑(病毒的存在时间较其他组织长)或骨髓等组织。生前可用灭菌棉拭子获取呼吸道或泄殖腔分泌物。将棉拭子浸出液或经研磨的组织悬液制成1:5~10乳剂,每毫升加青、链霉素各1000~2000单位,以抑制可能污染的细菌,置冰箱中作用2~4小时,然后离心沉淀,取其上清液作为接种材料。

该病临床上常有以下几种类型。

  1. 病毒分离和鉴定

2.1鸡胚接种

1.1
在基本上没有按计划接种疫苗的散养鸡群,发生的鸡新城疫疫情是十分急骤的,疾病往往从一家传到另一家,以致散养鸡连片地发病和死亡。病鸡头冠紫黑色,口流黏液,食欲废绝或嗉囊充满饲料而呈圆球状,粪便带黏液或血液、黄绿色,精神沉郁或昏迷。多在发病后1~3天内死亡,大多数整个庭院内或笼内的散养鸡100%死亡,偶尔存活的病鸡多有神经症状等后遗症,转圈或啄食不准确。剖检见内脏器官广泛充血出血,尤以消化道的腺胃乳头、肌胃角膜下出血为典型。

2..1病毒分离

常用9~10日龄的鸡胚,每份病料至少注入5个鸡胚,接种于绒毛尿囊膜或尿囊内。照蛋,划出气室位置,在鸡胚胎面观看胚胎活动,选择无大血管处标一记号。在气室顶部和标记处用碘酊和酒精消毒,并各钻一小孑L。用较干的碘酊棉球涂布小孔。用1
mL注射器吸取上述处理过的材料,插入小孑L内约3mm,缓缓注入0.1~0.2mL,拔出针头。用融化石腊封口,在蛋壳上标明日期。置37℃温箱培养,每天照蛋二次,至全部或大部分鸡胚发生死亡为止(24h内死亡的胚弃之)。将死胚收藏于4℃冰箱内,气室向上,6~24h获尿囊液。

1.2
在已接种过疫苗但抗体水平不高的肉鸡群,鸡新城疫症状不典型,常有咳嗽,呼吸异常,张口呼吸和呼吸困难,偶尔有怪叫声,死亡率因抗体水平高低及肉鸡日龄不同而异。1周龄以下的小鸡常可有10%~30%的死亡率,日龄较大的死亡率一般不超过10%。剖检多见喉气管充血出血,偶尔也见腺胃乳头肌胃角膜下出血的病例。

鸡出现临床症状后,在大多数器官和分泌物中即有多量病毒。呼吸道分泌物、肺、脑、脾都是很好的分离病毒的材料。如果死鸡已腐败,最好是从骨髓分离。分离病毒最好是接种孵化9~10天的鸡胚。以无菌手术取病料,加生理盐水作成10倍或20倍稀释的悬浮液,静置或离心后取上清液加适量抗生素抑菌(一般加青霉素300~5001U/mL和链霉素100~300μg/mL,在37℃放置th,或在O~4℃冰箱放置4h),以上清液0.
ImL接种于鸡胚的尿囊腔内。若为强毒株,2—3天内即可杀死鸡胚,若为弱毒株则需4~6天。应每天检查鸡胚1次,如有死亡即收集尿囊液,作细菌检查,并进行血凝试验及血凝抑制试验。为尽快作出诊断,也可在鸡胚死亡前用注射器吸出尿液做检查,再将鸡胚送到温箱孵化,一般在接种后36h就可测出血凝素。

收获尿囊液时,以碘酊涂擦气室和气室附近的蛋壳,用灭菌摄子将气室处蛋壳敲破,剥去蛋壳,用另一灭菌小镊子剥去蛋壳膜,并撕破绒尿膜,暴露出清晰的尿囊液(混浊者已污染,应弃去不收),以镊子将胚胎和胚膜压向一边,吸取尿囊液于灭菌瓶中,并加标签。

1.3
在接种过疫苗但抗体水平不整齐的蛋鸡群和种鸡群,鸡新城疫临床上往往表现为产蛋率不同程度下降,严重时死亡率可能稍有增加,但死亡率很少超过10%。病死鸡主要病理变化是输卵管黏膜充血水肿或点状出血,少数病例可有喉头和气管黏膜出血,极少数病例还有消化道黏膜出血。

2..2血凝试验

用透明而无菌者作血凝反应,可在96孔微孑L板上进行,也可将尿囊液一滴与1%~2%鸡红细胞悬液一滴在一块白瓷板上相混和,如发生红细胞凝集,即用已知抗鸡新城疫血清作血球凝集抑制试验,出现抑制反应,便可得到确诊。

在禽病较多较杂的情况下,鸡新城疫的诊断必须进行实验室的检验才能确诊。

新城疫病毒具有凝集禽类及某些哺乳动物红细胞的特性,并且对各种动物红细胞的凝集性与真性鸡瘟不同,因此可以用作初步判定的依据。此外,传染性支气管炎病毒和传染性喉气管炎病毒都不凝集鸡红细胞,因此也可作为鉴别诊断的方法。

2.2组织培养

实验室诊断可进行病毒分离与鉴定,如分离到的病毒对红细胞有血凝性且能被新城疫抗体所抑制,则可初步判定为新城疫病毒;如用该病毒接种非免疫鸡,能在接种病毒后7天内致死试验鸡,则基本上可以确诊为新城疫病。

2..3 血凝抑制试验

鸡新城疫病毒能在禽源原代细胞,一些哺乳动物的原代细胞和细胞系中生长繁殖,因此也可用细胞培养的方法来分离病毒。最常用的是在玻璃和塑料容器内长成单层的鸡胚成纤维细胞。操作时可将待检液作一系列十倍比的稀释,分别注入到鸡胚成纤维细胞的培养管中,24~48h出现细胞病变(细胞圆缩颗粒化,拉长呈蜘蛛网或干枝梅样),取培养液作HA和HI试验,鉴定病毒。也可在细胞培养中用已知血清进行中和试验,作出鉴定结果,如将待检材料注入鸡胚成纤维细胞的平皿培养中。新城疫强毒通常出现大而透明或大而红色蚀斑。根据蚀斑形成单位可测定病毒浓度。

如条件限制,不能进行病毒的分离与鉴定,也可在发病初期采病鸡群血清,在发病后2~4周再采集该鸡群血清,同时对前后两批血清进行新城疫病毒血凝抑制试验,如抗体滴度不下降反而上升,则判定鸡群感染了鸡新城疫病毒。如在测试期间需对鸡群接种新城疫疫苗,则应隔离几只被检鸡不接种疫苗作为对比检测用。

如果抗鸡新城疫血清能抑制可疑病毒对红细胞的凝集,则可判定此病毒为鸡新城疫病毒。除此之外,还可利用鸡新城疫病毒来鉴定病愈鸡的血清中是否含有抑制红细胞凝集的抗体,以决定该鸡感染的是否为鸡新城疫。如果可疑病鸡的血清能抑制新城疫病毒对血红细胞的凝集,即可判定该鸡曾患鸡新城疫。一般急性病鸡在死亡前血液中还不出现抗体,病程延续到5~6天以上的,血液中即出现血凝抑制抗体,病程在10天以上,抗体的效价往往可达1:1280,甚至更高。因此用已知病毒测定可疑血清的方法,在流行病学调查方面更有实用意义。

3、血清学检查

对鸡新城疫的预防,首先要加强生物安全措施,防止新城疫病毒进入鸡群。例如,应从无病的种鸡场中引进鸡苗,避免推销人员、外来人员、交通工具等进入场内;对进入鸡场的一切人员和物品都必须进行不同形式的消毒;加强鸡场的清洁卫生和定期消毒,使病毒找不到适合生存的地方和条件。

2..4 血清中和试验

由于循环抗体产生后,病毒可从寄主的组织中迅带消失,所以慢性病例难于分离病毒,应通过特异抗体的检查来间接诊断此病。通常中和抗体较血凝抑制抗体维持时间要长些,但中和试验较费时花钱,而HI试验能在短时间内作大量测定,检出的抗体滴度一般相当于中和滴度。因此常用HI试验来检查抗体。抗体滴度于感染后5~7d开始上升,15~20d可达高峰且能维持较长时间,受强毒感染而耐过的鸡在体内产生极高的抗体水平,滴度高达11以上。在感染群内出现高抗体的数量随鸡群原有的抗体水平而异,与鸡的年龄也有关系,平均可达30%,在只有少数出现症状,不断发生死亡的鸡群中,可对活鸡进行抗体检测。如有较多高抗体鸡的出现,说明鸡群已受过新城疫野毒感染。免疫过较长时间的鸡群持续保持高水平的抗体,可能是隐性感染或慢性感染的结果。

除卫生工作之外,还要按计划做好鸡新城疫的免疫接种工作。免疫程序的安排,应注意做到弱毒活苗和灭活疫苗配合使用,饮水、点眼滴鼻和肌肉注射三种接种途径配合使用,使循环抗体和局部黏膜抗体都达到较高水平。

既可用已知抗血清鉴定可疑病毒,又可用病毒测定血清中是否含有特性抗体,以确定是否曾感染过鸡新城疫。在鸡新城疫免疫血清或待检血清中,加入一定量的待检病毒或已知病毒,混合后注射于发育鸡胚或有易感性的鸡,另以不加血清的病毒作对照。倘若注射血清及病毒混合材料的鸡胚或鸡不死亡,而对照鸡只死亡,则可判定待检病毒为新城疫病毒。也可用不同稀释倍数的血清,各加一定量的病毒以测定血清的中和抗体量。

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参考免疫程序为:1日龄,克隆30或Ⅳ系疫苗点眼滴鼻;7~10日龄,注射灭活疫苗,同时再用弱毒疫苗点眼滴鼻;25~30日龄,弱毒疫苗点眼滴鼻;45~50日龄,注射灭活疫苗;开产前1个月,注射灭活疫苗,另用弱毒疫苗点眼滴鼻和饮水;开产后每1个月用弱毒疫苗点眼滴鼻和饮水各1羽份;每3个月注射一次灭活苗。

3鉴别诊断

新城疫的实验室诊断

3.1 与鸡霍乱的鉴别

临床诊断:1.精神萎靡,采食减少,呼吸困难,饮水增多。常有“咕噜”声,排黄绿色稀便;2.发病后部分鸡出现转脖、望星、站立不稳或卧地不起等神经症状,多见于发病的雏鸡和育成鸡;3.产蛋鸡产蛋减少或停产,软皮蛋、褪色蛋、沙壳蛋、畸形蛋增多,卵泡变形、卵泡血管充血、出血。4.腺胃乳头出血,肠道表现有枣核状紫红色出血、坏死灶。喉头和气管黏膜充血、出血,有粘液;5.血凝抑制抗体显著升高或两极分离,离散度增大;6.注意新城疫与禽流感、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、肾传支等的并发和继发感染情况,在诊断和防治鸡新城疫的同时,应特别留意与这些疾病的鉴别诊断与联合防治,特别是联合免疫工作;7.应注意非典型新城疫患病鸡群和高免鸡群中由于漏免而存在的易感个体在存储和散播新城疫病毒过程中的作用,重视防治非典型新城疫及避免漏免得情况发生。实验室诊断:在国际贸易中,尚无指定诊断方法。替代诊断方法为血凝抑制试验。病原检查:①病毒培养鉴定:样品经处理后,接种9~10日龄SPF鸡胚,37℃孵育4~7天,收集尿囊液做HA试验测定效价,用特异抗血清或I试验判定ND病毒存在。②毒力测定:1日龄雏鸡脑内接种致病指数测定、6周龄鸡静脉内接种致病指数测定、鸡胚平均死亡时间测定。血清学试验:病毒血凝试验、病毒血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验(ELISA,用于现场诊断、流行病学调查和口岸进出境鸡检疫的筛检)。样品采集:用于病毒分离,可从病死或濒死禽采集脑、肺、脾、肝、心、肾、肠或口鼻拭子,除肠内容物需单独处理外,上述样品可单独采集或者混合。或从活禽采集气管和泄殖腔拭子,雏禽或珍禽采集拭子易造成损伤,可收集新鲜粪便代替。上述样品立即送实验室处理或于4℃保存待检或一30℃保存待检。用于血清学试验的样品,一般采集血清。

在流行病学方面,鸡霍乱的流行往往仅限于个别鸡群或小范围的地区,鸡新城疫往往波及全村全区。鸭一般不感染鸡新城疫,但对鸡霍乱极为易感。如果在同一牧场或同一地区,同时有鸡鸭大批死亡,则很可能是鸡霍乱而不是鸡新城疫。在症状方面,慢性鸡新城疫常呈神经症状,鸡霍乱则没有神经症状,仅偶有表现关节炎症状的。鸡霍乱的病程很短,常在3~5天内死亡。在病理解剖方面,患鸡霍乱死亡的鸡,肝脏上常有灰黄色坏死点,心包膜内常有大量纤维蛋白性渗出液,肠道没有溃疡。鸡新城疫的肝脏没有坏死点,心包膜内的渗出液较少,肠黏膜上多有溃疡。

3.2 与传染性喉气管炎的鉴别

传染性喉气管炎的病原是一种滤过性病毒,传染很快,发病率很高。主要症状是呼吸困难,咳嗽。与新城疫的主要区别是无下痢和神经症状,病变仅限于喉部及气管,呈出血性或白喉性的喉炎及气管炎。死亡率一般为15%。

3.3 与传染性支气管炎的鉴别

病原也是滤过性病毒,在许多方面和传染性喉气管炎相似。主要危害雏鸡,成鸡不死亡。没有消化道病变和神经症状以及死亡率低等特点,可与鸡新城疫区别。

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