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正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。本品系用A型口蹄疫病毒细胞毒,接种仔猪肾代传细胞培育,收获细胞培育液,经浓缩制成。用于检测血清中的口蹄疫病毒感染相关抗体。本品为淡褐色澄明液体。用于检测牛、羊、猪、鹿、骆驼等动物血清中的VIA抗体

本抗原系用猪肺炎支原体Z、C株,接种适宜培养基培养,收获培养物,浓缩、裂解、致敏醛化绵羊红细胞后,经冷冻真空干燥制成。用于诊断猪支原体肺炎。
本品为棕色疏松团块,加PBS后能迅速溶解,不出现肉眼可见的凝块。

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正规赌博十大app排名,血清处理被检血清和口蹄疫标准阳性血清均在56℃灭活30min。琼脂糖平扳的制备取琼脂糖1g、Tris低盐溶液100mL装入三角瓶中,于沸水中加热或高压使琼脂糖熔化,然后吸取琼脂液7mL加到直径约5.5cm的平皿中,制成约3mm厚的琼脂板。待琼脂完全凝固后,加盖置2~8℃湿盒中,备用。打孔和加样按六角形打孔,中心孔和外周孔的孔径及孔距均为4mm。中心孔加VIA抗原,1孔和4孔加口蹄疫阳性血清,2、3、5、6孔加被检血清。扩散和察看将加样后的琼脂平板置湿盒中于室温下任其自然扩散。24h后进行第1次察看,72h后作第2次察看,168h后作最后察看。察看时,可借助灯光或自然光源。若为弱反应,须借助于强烈光源才能看清沉淀线。判定当l孔和4孔标准阳性与中心抗原与中心抗原孔之间形成沉淀线时,若被检血清孔与中心孔之间也出现沉淀线,并与阳性沉淀线末尾相融合,则被检血清判为阳性;被检血清孔与中心孔之间虽不出现沉淀线,但阳性沉淀线的末尾向内弯向被检血清孔,则被检血清判为弱阳性;如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,且阳性沉淀线指向被检血清,则被检血清判为阴性。在2~8℃,有效期为10个月。lmL/瓶2mL/瓶4mL/瓶

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兔波氏杆菌病又称为支气管败血波氏杆菌病,引起兔的一种以慢性鼻炎、支气管肺炎及咽炎为特征的呼吸道传染病。

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网赌app平台,正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。(1)用法a.首先用记号笔在72孔“V”型微量反应板的一边标明被检血清、阳性猪血清、阴性猪血清及抗原对照,各占一排孔。b.滴加稀释剂用微量移液器每孔加0.025mL稀释剂。c.血清稀释使用微量稀释棒先在稀释液中预湿后,经滤纸吸干,再小心地蘸取被检血清立于第一孔中,可以同时稀释11个血清,以双手合掌迅速搓动11根稀释棒,达60次,然后将11根稀释棒小心平移至第2孔,搓同样转速和次数,再移至第3孔(被检血清可以只稀释到第4孔,即血清稀释到1:40),而阳性猪血清、阴性猪血清必须稀释到第6孔。d.滴加抗原致敏红细胞用微量移液器吸取摇匀后的2%抗原致敏红细胞悬液,每孔加0.025mL。e.抗原对照为0.025mL稀释液加0.025mL2%抗原致敏红细胞悬液,只做2孔。f.振荡加样完毕后,置微型振荡器上振荡15-30s,室温下静置1-2h,观察记录结果。(2)判定以呈现“++”血凝反应的血清最高稀释度作为血清效价判定终点。

正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。1 病原学诊断

正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。凝集反应强度标准如下:

澳门十大赌场官方网,1.1 细菌培养

正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。++++红细胞在孔底凝成团块,面积较大。

样品采集:病兔,将灭菌棉拭子在无菌生理盐水中浸湿,插入病兔鼻腔内,深约10mm,小心转动,蘸取鼻汁;死亡兔或扑杀致死兔,取鼻腔、气管、肺部病变材料用于细菌分离培养。

+++红细胞在孔底形成较厚层凝集,卷边或锯齿状。

正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。细菌分离:将附着在棉拭上的黏液涂抹在麦康凯培养基或DHL培养基上,37℃培养48h。肺部病变材料进行培养时,还可用血液琼脂培养基。

正规赌博十大app排名如被检血清孔与中心孔之间不出现沉淀线,插入病兔鼻腔内。++红细胞在孔底形成薄层均匀凝集,面积较上二者大。出现“++’’以上凝集时为红细胞凝集阳性。

结果判定:在改良麦康凯培养基上,支气管败血波氏杆菌菌落直径约1~2mm,圆整、光滑、隆起、透明,略呈茶红色,较大菌落中心厚,呈茶黄色。在DHL琼脂平皿上形成无色半透明,2mm左右菌落。

+红细胞不完全沉于孔底,周围少量凝集。

1.2 病原鉴定

±红细胞沉于孔底,但周围不光滑或中心空白。

生化试验:不发酵碳水化合物,葡萄糖、荒糖、乳糖、甘露醇、果糖木糖呈碱性反应。M.R.试验、靛基质试验、硫化氢产生阴性,V-P试验、枸橼酸盐利用、尿素酶产生、硝酸盐还原、运动力试验阳性。

一红细胞呈点状沉于孔底,周边光滑。

动物接种试验:常选用幼兔或豚鼠,鼻内接种4h培养物0.1mL,应在几天内出现鼻炎和肺脓肿的典型症状和病理变化。0.5mL剂量耳静脉接种家兔,应于24~48h内死亡。从死亡兔的病变组织及扑杀的活兔的肺脏中均可分离到本菌。

微量反应板静置1-2h后,阳性对照猪血清效价应≥40“++”,阴性对照猪血清效价应1:5,抗原对照应无血凝现象。

血清平板凝集反应:在清洁的玻片上加一滴阳性血清,充分混入一铂圈被检菌,轻轻晃动玻片,室温下放置2min。液滴中出现大凝集块或小的粒状凝集物,液体透明,判为阳性。每次试验应设有阴性血清对照和缓冲生理盐水对照。结果判定:液滴中出现大凝集块或小的颗粒状凝集物,液体透明,判为阳性。

被检猪血清效价1:10(即达到第2孔以上)时,判为阳性;效价1:5时,判为阴性;介于二者之间时,判为可疑。

免疫荧光检测抗原:应用直接荧光抗体技术,检查鼻甲骨、气管、细支气管及肺脏上皮细胞,观察到颗粒样抗原者判为阳性。该试验一般在感染后7~28天即可检出抗原。

在2-8℃,有效期为6个月;在-15℃为1年6个月。

  1. 血清学诊断

2..1 凝集反应

将Ⅰ相菌接种到胰蛋白酶大豆肉汤中,37℃培养24~48h,加福尔马林灭活,作为抗原。取凝集抗原与系列稀释的被检血清等量混合,37℃
2h或56℃
30min。4℃作用1夜判定。结果为1∶10被检血清呈现明显颗粒状凝集者判为阳性。家兔在感染后2~4周,即可从血清中测出凝集抗体。

2..2 免疫扩散试验

抗原制备:将Ⅰ相菌接种在含绵羊鲜血的鲍-姜琼脂培养基上,37℃潮湿温箱中培养36h,向生长良好的Ⅰ相菌培养物中加入缓冲生理盐水,充分振荡后,使菌体分散于溶液中而制成悬液,其菌数为2500亿/mL,再添加福尔马林使其含量为0.37%,摇匀,瓶口加盖胶塞,放置37℃温箱过夜,次日取出,放室温3~5天,每天振荡3次。以500~1000转/min离心沉淀20min,弃上清液;缓冲盐水洗涤沉淀物,12000~15000转/min离心20min,弃上清液;向沉淀加少量缓冲盐水,按万分之一比例加入硫柳汞防腐。采用辐射免疫扩散法(将其8倍沉淀抗体滴度的抗血清,按10%比例加入到1%琼脂糖Tris缓冲溶液中,制成反应板,然后打孔,室温下湿室作用即可)测定,在反应板上出现直径10mm±1mm明显沉淀者为合格抗原。分装后4℃保存。

阳性血清制造:将上法接种于鲍-姜氏培主基上的Ⅰ相菌用灭菌PBS洗下,记数后加入福尔马林灭活,耳静脉注射3~6月龄的经支气管败血波氏杆菌免疫扩散法检查阴性的健康家兔,每只兔1mL。第一次菌数为100万/mL,以后每周加强免疫1次,每次菌数递增10倍,计6次。最后一次注射后4~5天采血,用免疫扩散法测定抗体滴度在8倍以上为合格,第七周自心脏采血,无菌收集血清。

免疫扩散试验配制:0.7%~1.0%的琼脂糖Tris反应板,按试验方法打孔,并在相应孔中加入抗原或血清。室温下湿室中作用,第二天开始判定,逐日观察记录结果,3天后最后判定。抗原孔与被检血清孔之间形成一条致密的沉淀线并且其末端与毗邻的阳性血清孔与抗原之间的沉淀线相融合者判为阳性,阳性血清与抗原孔之间的沉淀线末端相毗邻的被检血清孔之抗原方向偏弯者亦判为阳性。观察时可借助灯光或自然光源,特别是弱反应须在强烈的日光灯光源照射下才能看清沉淀线。

采用本法检查时,家兔被支气管败血波氏杆菌感染后7~10天即可检出血清抗体,血清中沉淀抗体的存留期在1年以上。本法与细菌分离的符合率在95%左右。

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